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采用高壓滅菌的，升火前應(yīng)打開放氣閥門，當(dāng)水蒸氣大量噴發(fā)時，關(guān)閉放氣閥，加大火力，當(dāng)壓力表盤為0.15帕次放氣時開始計(jì)時，在此氣壓下持續(xù)4個小時即可?；?。當(dāng)壓力表降至0帕?xí)r，打開放氣閥排氣，把壓力鍋門打開自然降溫。采用常用滅菌的，在蒸籠底部一角放一支溫度計(jì)，升火后溫度至100°C時開始計(jì)時，維持12個小時后停火，悶上一夜，然后打開蒸。當(dāng)料溫降至40°C時，移入接種袋或接種箱中，然后放入酒精、棉塞、包扎帶、氣霧消毒盒、火機(jī)、接種鉤、菌種，菌種用百菌清或5%水浸洗，同時有紅、綠、黃等色雜菌的菌種，每四筒料放一包菌種。一切就緒后封閉接種箱，點(diǎn)燃消毒盒20分鐘后可實(shí)現(xiàn)接種，接種時操作人員預(yù)先用75%酒精消毒雙手，然后小心伸入接種箱中，從尾部撕開種袋接種，種頭接近棉塞處的表皮種 棄之不用。地養(yǎng)室培養(yǎng)，此時培養(yǎng)室溫度保持24~30°C,12小時后種子開始萌發(fā)吃料，20天后當(dāng)菌絲長至筒料一半時，把接種端袋口稍稍打開通氣培養(yǎng)，菌絲長滿后，零星出現(xiàn)原基時，進(jìn)入菌棚排場管理。
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靈芝，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，屬于擔(dān)子菌綱多孔菌科靈芝屬的一種藥用真菌植物．靈芝孢子是靈芝在成熟時從菌蓋中彈射出來的極小的孢子，具有較高的藥用價值和藥理活性，其藥理作用主要為、免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、神經(jīng)保護(hù)、保肝和抗等．由于靈芝孢子具有雙層細(xì)胞壁，其主要為幾丁質(zhì)、纖維素、木質(zhì)素等，導(dǎo)致其細(xì)胞壁堅(jiān)韌，不易破解，使其中的有效成分難以被人體吸收利用．對此，本研究主要綜述了靈芝孢子的破壁方法及其藥理作用，以期充分了解靈芝孢子的研究現(xiàn)狀，為其進(jìn)一步的研究、開發(fā)和利用提供一定的參考依據(jù)． 靈芝孢子破壁方法目前，國內(nèi)外有關(guān)研究對靈芝孢子的破壁方法概括起來主要有5種，分別為生物法、化學(xué)法、物理法、機(jī)械法和綜合法．生物法生物法的優(yōu)點(diǎn)是基本不消耗能量，破碎效果較好，設(shè)備簡單;缺點(diǎn)是需要的時間較長，并且難以去除殘留的酶液或生物等．孢子萌發(fā)法．孢子萌發(fā)法主要利用靈芝孢子自身的萌發(fā)能力破壞靈芝孢子細(xì)胞壁，釋放胞內(nèi)成分．將靈芝抱子和面粉等混合，在溫度27?29°C、相對濕度75%?85%條件下發(fā)酵，結(jié)果顯示，靈芝抱子萌發(fā)良好．
酸、堿降解法．酸、堿降解法利用無機(jī)或有機(jī)酸、堿等破壞靈芝孢子細(xì)胞壁中幾丁質(zhì)、纖維素等成分的結(jié)構(gòu)，使其有效成分易于溶出．使用無機(jī)酸或有機(jī)酸溶液熱處理靈芝孢子提取靈芝多糖，多糖中分子量在2000~4900Da的部分均在60%以上.物理法物理法的工作原理各異，優(yōu)缺點(diǎn)也不相同，總體來說，物理法的能量消耗較大，且設(shè)備較為復(fù)雜、投資較大．低溫冷凍法．低溫冷凍法利用靈芝孢子中的水分在低溫條件下結(jié)晶、結(jié)晶長大等作用破壞靈芝孢子細(xì)胞壁．例如，金剛陰在實(shí)驗(yàn)中將靈芝抱子在-20T反復(fù)凍融，其破壁率高達(dá)99.5%．超聲波法．超聲波法主要利用超聲的空機(jī)械振動和空化效應(yīng)來破壞靈芝抱子細(xì)胞壁.例如，Alzorqi等利用超聲波提取P-D-葡聚糖,在優(yōu)化條件下p-D-葡聚糖的產(chǎn)量為5.228mg/g．波法．波法利用波的穿透能力和熱效應(yīng)，使細(xì)胞內(nèi)部的溫度迅速上升，從而使細(xì)胞內(nèi)部的壓力超過細(xì)胞壁膨脹所能承受的壓力而破碎，促使其有效成分釋放．例如，先將靈芝抱子進(jìn)行波處理，而后在低溫深加工，靈芝抱子的破壁率可達(dá)99%以上．
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